东富龙细胞培养一站式解决方案之细胞消化--Recombinant Trypsin Solution非动物源重组胰酶消化液
在细胞培养中
贴壁细胞的消化是一个不容小觑的问题
如何?
安全!
有效!
进行细胞消化?
Don’t Worry
快,看过来!
东东为您推荐
完全重组胰蛋白酶消化液
PDE RecTrypsin-LQ02(1X)和PDE RecTrypsin-LQ03(10X)是一种由微生物发酵产生的高纯度的重组酶消化液,可以用于解离多种贴壁的哺乳动物细胞,且不影响细胞生长及活率,包括人二倍体细胞、VERO、MDCK、293、CHO-K1、鸡胚原代细胞等,其纯度超高,仅有单一种酶作用,解离的特异性更强并且毒性更低,从下游纯化的难度来看,是一个更省心的选择。本产品含 EDTA,不含酚红。
产品优势
Ø 作用温和:有且仅有一种酶,可降低胰蛋白酶对细胞表面各种蛋白的作用,保持细胞健康
Ø 活性稳定:2-8℃储存和运输,无需-20℃储存
Ø 不需清除:直接植入实验和生产方案中,仅靠稀释即可降低酶活,不需检测残留;
Ø 非动物源:无外源性病毒污染,不需检测病毒,符合国家药典对于生物制品病毒安全性控制的要求
Ø 无菌包装:使用更安全
Ø 国产原研:厂家直销,性价比高,供货保证
Ø 无需添加抑制剂:细胞传代时,仅用培养液稀释即可
应用案例1:Vero细胞
应用案例2:293T细胞
详见:东富龙公众号
操作步骤(以T75瓶为例)
(PDE RecTrypsin-LQ02(1X))
1、37℃ 水浴加热消化液及细胞培养液。
2、用移液枪移取覆盖于细胞表面的培养基并丢弃。
3、使用 5-10mL 不含钙离子和镁离子的 DPBS 缓冲液洗涤细胞,并吸取丢弃,重复此步骤两遍。
4、添加3mL的1X重组胰蛋白酶消化液,前后摇晃T瓶,以胰蛋白酶全部覆盖细胞为准。大多数细胞消化时间是30s-5min,至细胞明显收缩成球状,轻敲培养瓶可发现培养瓶底部呈现可移动的沙状,即可停止消化。
5、在培养瓶中加入 3 mL 的预热完全的培养基,终止消化,细胞悬液转移至 15mL 离心管中。
6、200g离心 5分钟。丢弃上清液并将细胞重悬于新鲜预热培养基中计数,确定细胞密度与活率。
7、根据您的细胞类型,按照常规方案进行后续实验。
以上方案仅适用于贴壁细胞