不同培养基培养HEK293细胞的生长及代谢对比
- 2025-01-22
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不同培养基培养HEK293细胞的生长及代谢对比
人胚胎肾(HEK)293细胞广泛应用于生物制药、基础医学研究和细胞治疗解决方案领域的细胞株。细胞于1973年由荷兰莱顿的Alex Van Der Eb利用腺病毒5 DNA转染正常健康人胚胎肾（HEK）细胞培养而成，数字293源自其实验室笔记本中引用的实验编号。HEK293细胞与其他呈圆形的常见细胞株不同，通常表现出树突状突起，略呈颗粒状，且倾向于结团。HEK293细胞株广受欢迎，因其在培养物中生长迅速，且易于被转染载体（如腺病毒）转导，特别是通过磷酸钙方法转染可实现近100%的转染效率。 基于此，东富龙通过前期研究对HEK293细胞在不同培养基中的生长及代谢来分析HEK293细胞对培养基的适应性，从而为后续转染提供一个好的实验依据。 比较东富龙HEK293系列培养基(HEK293 CDM26 Pro)与某品牌COM培养基对HEK293细胞培养过程的生长及代谢。 复苏HEK293细胞株，分瓶后分别用东富龙HEK293 CDM26 Pro和某品牌COM两款培养基培养观察3个代次，比较不同培养基条件下细胞的生长与代谢。 实验一 图 1 :第一代两种培养基培养过程中葡萄糖/乳酸浓度变化(A) 及细胞密度和活率变化(B) 如图1所示，第一代细胞培养结果表明，某商业化（COM）培养基中细胞的葡萄糖摄取速度和细胞密度增长速率均大于Tofflon 培养基中的细胞。这可能是培养基品质的差异，也可能是细胞长期处于COM培养基培养的结果。因此，继续传代，观察细胞的葡萄糖摄取速率和细胞密度的增长情况。 实验二 图 2 :第二代两种培养基培养过程中葡萄糖/乳酸浓度变化(A)及细胞密度和活率变化 (B) ；第三代两种培养基培养过程中葡萄糖/乳酸浓度变化(C)及细胞密度和活率变化(D) 如图2所示，无论第二代还是第三代细胞，COM组的细胞的葡萄糖摄取速度更快。但是，两组的细胞密度增长情况大致相同，这说明HEK293细胞逐渐适应了Tofflon 培养基。 实验三 图 3: 细胞代际葡萄糖摄取速率和产率系数的变化 如图3所示，为了更好的对比细胞的代谢底物能力和生物质合成能力，我们计算了细胞的葡萄糖摄取速率（∆葡萄糖浓度/∆t）和产率系数（∆细胞密度/∆葡萄糖浓度），从而获得了如下实验结论。 随着传代过程，细胞密度不断增大，两组的细胞的葡萄糖摄取速率随之增大，COM组细胞的葡萄糖摄取速率高于Tofflon组，但是Tofflon组的产率系数随传代过程逐渐增大，并明显高于COM组，这说明Tofflon组的细胞将底物葡萄糖更高效地转化为生物质。因为细胞对底物的利用效率不同，细胞内的葡萄糖的代谢通路及转化产物应该表现出一定的差异，HEK293细胞已适应Tofflon培养基并优于COM培养基。 HEK293系列培养基包含HEK293 CDM15、HEK293 CDM26、HEK293 CDM26 Pro三款产品，均为不含蛋白及水解物的完全化学成分限定培养基。适应于HEK293各细胞系细胞（如HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293等）规模化无血清悬浮培养及后续转染表达。用于蛋白表达，慢病毒，腺病毒表达，腺相关病毒等相关产品研发和生产过程，可支持细胞高密度扩增及稳定的产物表达。为了适应不同培养体系及蛋白、病毒生产工艺，配套培养基产品提供对应补料（Tobitec FedVigor01），同时也可匹配其他商业化补料产品。
